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细胞复苏的秘密武qi!

来源:北京缔一生物科技有限公司   2022年06月09日 13:39  

细胞培养是指细胞在体外的培养技术,即在无菌条件下,从机体中取出组织或细胞,模拟机体内正常生理状态下生存的基本条件,让它在培养皿中继续生存、生长和繁殖的方法。通过细胞培养我们可以获得大量的、性状相同的细胞,以便于研究细胞的形态结构、化学组成及功能和机制。

细胞真的很脆弱,就像小婴儿一样,需要你无微不至的关怀。

细胞培养的开始,就是复苏细胞。如何有条不紊地让细胞从沉睡中苏醒?今天就来给大家总结几个实用小技巧,快点来get!


细胞复苏流程:


1、将冻存的细胞从液氮罐中取出,立即放入37°C的水浴中进行融化,轻柔晃动,加速融化,直到小瓶中只剩下一小块冰,时长应控制在1min中;


2、用70%乙醇擦拭瓶外后转移无菌操作台中,打开瓶盖前,用酒精灯火焰对瓶口进行消毒;


3、将预加热的新鲜*培养基滴入小瓶中。缓慢用移液枪吸取瓶中液体至15ml离心管中,加入适量浓度和体积的*培养基,轻柔混合均匀;


4、200 × g左右细胞悬浮液离心5-10分钟。实际的离心速度和持续时间因细胞类型而异。弃掉上清,加入新鲜*培养基重悬细胞,并将其转移到适当的培养容器和推荐的培养环境中。


细胞解冻流程图


注意事项:


1、液氮温度低,小心低温对人造成的伤害,在液相中储存的冷冻瓶在解冻时存在爆炸的风险,因此,取出冻存管的时候,要做好个人防护。


2、通常细胞集中储藏在液氮中,取出时应迅速,避免温差对其他冻存细胞造成影响。


3、复苏细胞的核心技术,简而言之就是快融,将在37°C水浴中快速解冻冷冻细胞(< 1分钟。


4、解冻时,冻存管先放入无菌一次性PE手套中,再放入水中融化,避免污染也方便操作。


5、用预热过的培养基慢慢稀释解冻的细胞。


6、解冻细胞后,在培养皿中培养时,应尽量维持高密度,以提高细胞存活率。


7、注意无菌操作,避免细胞发生污染。


细胞高效解冻的另一个成功秘诀,就是选择一款优质血清!


Ausbian进口特级胎牛血清,有以下优点,可以大程度地帮助实验者提高细胞实验成功率:


1. 精选内毒素更低批次(≤3EU/ml)。是细胞典藏等重大项目十几年的稳定供应品牌。

实验室有些细胞,需要长期培养、长期冻存,或者经常复苏、经常培养的,血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康,都应该选用更低内毒素的血清,以避免内毒素长久对细胞的毒性影响。

2. 新批次在试用前,提供试用服务,养细胞更放心。

3. 每个批次产量800-2000升,试用满意的实验室批号优先锁定,保证大多数项目两年不需换批次,细胞试验数据稳定。

4. 每年按厂家生产顺序,会有多批次平行供应,每个实验室专属批号管理,保证供货稳定。

5. 为Ausbian血清用户免费提供申报支持,具有完整的检测报告,为各类项目的申报提供支持(同时为血清VIP用户在支原体检测、方法学验证等方面,提供更多免费延伸性技术帮助)。

6. 针对特殊科研项目,可提供3-5个平行批次,让试验人有更多选择空间。

7. 为Ausbian血清提供免费代储存服务,为储存空间不足的实验室提供可靠的血清仓储保护,按要求随时发货。

8. Ausbian血清从出厂,到实验室,全程低温冷链保护,确保血清无反复冻融。

9. 免费真品保障,每个血清瓶身加贴Viansaga®易破损防伪标签,Ausbian品牌真品保护,逢假必究,为实验室做好售后保障。

10. 免费无忧售后,所有实验室签收的Ausbian胎牛血清,从签收日开始计算,一年之内,血清在妥善保管、未开封未融化、且不影响二次销售的情况下,均可享受无条件退货或换货的售后保障。

11. 免费专业帮助,汇集近二十年,千万个血清用户细胞培养经验,为各种细胞培养提供问题梳理分析,解决方案参考。

12. Ausbian品牌拥有全系列血清产品线:

特级胎牛血清、细胞治疗专用胎牛血清(货号:WS500T(红点)),透析胎牛血清 (货号:VS500TZ )等多系列产品,服务更专业更精准。

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